傳統(tǒng)的M1/M2模型可以用于體外培養(yǎng)和刺激，來探索不同類型的巨噬細(xì)胞活化狀態(tài)，但對(duì)組織巨噬細(xì)胞復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)的新認(rèn)識(shí)清楚地表明，其無法充分描述這些細(xì)胞在體內(nèi)的功能和表型多樣性。 因此，我們建議基于多種標(biāo)志物的表達(dá)和功能特征，采用更靈活和更全面的方法來代替過分簡(jiǎn)化的M1/M2模型。然而，用于定義M1和M2表型的經(jīng)典標(biāo)志物仍然在巨噬細(xì)胞表征中發(fā)揮重要作用。一些傳統(tǒng)的標(biāo)志物，包括誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（iNOS，NOS2）、精氨酸酶-1（Arg1）、甘露糖受體（CD206）、RELM-a（FIX1）和CD163，用于表征巨噬細(xì)胞。

iNOS和精氨酸酶1

巨噬細(xì)胞（至少在小鼠細(xì)胞中）經(jīng)典激活型和替代活化型的標(biāo)志物分別為iNOS和Arg1。iNOS是一種酶，可催化L-精氨酸的NADPH依賴性氧化反應(yīng)生成L-瓜氨酸和一氧化氮（NO）。一氧化氮是細(xì)胞毒性和其他生理功能（例如，血管舒張）的重要介質(zhì)。iNOS在巨噬細(xì)胞中不是組成型表達(dá)，其存在能表明此前用促炎細(xì)胞因子（如IL-1、TNF-α或IFN-γ）刺激的結(jié)果。

Arg1酶將L-精氨酸轉(zhuǎn)化為尿素和L-鳥氨酸。通過降解精氨酸，Arg1占據(jù)了iNOS的底物，并且下調(diào)一氧化氮生成。IL-4和IL-13強(qiáng)烈誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞表達(dá)Arg1，而不是由抗炎細(xì)胞因子（如IL-10或TGF-b）誘導(dǎo)。與iNOS表達(dá)相反，在多個(gè)組織巨噬細(xì)胞群中發(fā)現(xiàn)Arg1有表達(dá)。例如，大多數(shù)小鼠大腹膜巨噬細(xì)胞（F4/80 高巨噬細(xì)胞）在穩(wěn)態(tài)下呈Arg1陽性。Arg1不應(yīng)被視為M2極化的*特異性標(biāo)記，尤其是分析原代未培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)。

甘露糖受體（CD206）

巨噬細(xì)胞甘露糖受體，稱為CD206或甘露糖受體C類型1（MRC1），介導(dǎo)真菌、細(xì)菌、原生動(dòng)物和病毒抗原的吞噬和內(nèi)吞攝取，并且在免疫防御及其調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用。甘露糖受體是替代活化巨噬細(xì)胞的原始識(shí)別標(biāo)志物。與Arg1相反，CD206廣泛地在替代活化型巨噬細(xì)胞中表達(dá)，包括用IL-10或糖皮質(zhì)激素處理的耐受性細(xì)胞。有趣的是，TGF-b被證明可以下調(diào)CD206的表達(dá)。抑制這種受體表達(dá)的其他因素包括LPS、IFN-γ和TNF-α。與Arg1相似，CD206組成型表達(dá)地表達(dá)于多種類型的組織巨噬細(xì)胞中，盡管它與Arg1的表達(dá)模式不*重疊。

RELM-a（FIZZ1）

RELM-a，也稱為抵抗素樣α或FIZZ1，是一種由IL-4和IL-13強(qiáng)烈誘導(dǎo)的小細(xì)胞因子，參與抵抗寄生蟲感染的反應(yīng)。與Arg1相似，糖皮質(zhì)激素和IL-10不能誘導(dǎo)RELM-a。盡管如此，這兩種常用的M2活化標(biāo)志物的在體內(nèi)表達(dá)的模式非常不同。例如，在沒有刺激的情況下，大多數(shù)小腹膜巨噬細(xì)胞（F4/80 lo）和少數(shù)大腹膜巨噬細(xì)胞（F4/80 hi）表達(dá)RELM-a。

CD163

CD163為觸珠蛋白和血紅蛋白受體。由于CD163的主要功能是促進(jìn)鐵的再循環(huán)過程，因此在脾紅髓巨噬細(xì)胞中可以觀察到CD163的最高表達(dá)。CD163還可以用于檢測(cè)某些細(xì)菌化合物，并且在組織巨噬細(xì)胞的其他亞群中表達(dá)，包括Kupffer c細(xì)胞、腸固有層巨噬細(xì)胞和一部分大腹膜巨噬細(xì)胞，盡管表達(dá)程度較低。與人CD163不同，小鼠CD163不容易由M2極化細(xì)胞因子誘導(dǎo)，故不是鼠科動(dòng)物M2巨噬細(xì)胞的良好標(biāo)志物。相反，其表達(dá)似乎表明了組織特異性巨噬細(xì)胞功能（例如，血紅蛋白再循環(huán)）。